2024版新款RNAfast200 总RNA快速提取试剂盒上市

RNAfast200 超纯总RNA极速抽提试剂盒

适用范围：细胞、病毒、或者微量的植物组织以及哺乳动物组织   货号：220010    规格：50t /100t

试剂盒组成、储存、稳定性：

储存事项：

1. 因此运输和储存均在室温下（15℃-25℃）进行。RA2 可以常 温运输，收到后 4℃避光可长期保存，常温保存 3 个月也不影响使用质量。

2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用 后应及时盖紧盖子。

产品特点：

1. 目前已知速度最快、步骤最少的总RNA提取试剂盒；2. 提取产物中DNA、蛋白质及盐类污染极少，4℃放置5天无显著降解；3.与Trizol相比，提取的RNA质量高，不同提取操作批次间变异小；4.适用性广，可同时适用于动物组织、细胞、细菌、病毒、血浆、体液等；

注意事项

1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇， 加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入! 2. 本试剂盒抑制RNA酶效果极佳，所有离心步骤如未加说明，均可在常温进行。 3. RA2裂解液中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量 清水或者生理盐水冲洗。 4. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的 RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为 ~2Kb（28S），~1Kb（18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以 看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。 5. 加入RA2裂解液匀浆后，离心前样品可在 -60℃至-70℃ 保存一个月以上。 6. 若提取细菌RNA，推荐使用我们另外一款细菌RNA快速提取试剂盒（RN4302）。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 提示：第一次用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇!

1. 关于平衡液的使用

   核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会老化而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团，提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液，若不小心碰到，请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖，以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成，请加热至37℃使沉淀完全消失。

   使用方法：吸取100μl的平衡液至柱子中。13000 g离心1分钟，倒掉收集管中废液，将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。

2. 样本预处理

a. 植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在RA2中迅速研磨，每25 - 50 mg组织加入0.5 ml RA2，混匀1分钟。

b. 动物组织：取新鲜或-70℃冻存动物组织尽量剪碎，每15 - 50 mg组织加入0.5mlRA2，匀浆仪进行匀浆处理或在液氮研磨后加入0.5mlRA2混匀1分钟。

c. 单层培养细胞：尽量去除干净残留培养液后直接往直径3.5 cm 的培养板中加入0.5mlRA2覆盖并反复吹打裂解细胞1分钟。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的RA2量（每10cm2加0.5 ml）。 当RA2量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。

▲注意：贴壁培养细胞往往不能完全从培养瓶脱落，这并不意味着裂解不完全，此时细胞膜实际已经完全破裂开，并已释放出全部RNA，继续做即可。

d. 细胞悬液： 离心收集细胞，加入RA2试剂后用移液管反复吹打来裂解细胞。每1 - 5×106 的动物细胞，植物细胞或每5×106细菌加0.5 ml RA2混匀1分钟。在加入RA2 前应避免洗涤细胞，因为那样会增加mRNA降解的可能性。破裂某些细菌可能需要使用匀浆器。

e. 液体样本：每200 μl（低于200 μl时，可用RNase-free H2O补足）血浆、 血清等液体样本，加入0.5ml RA2后振荡混匀1分钟 。

3. 得到的溶液转入吸附柱 RA中（吸附柱套在收集管内， 12,000g 离心 30 sec，弃废液，将吸附柱重新套回收集管。 ▲吸附柱容积为 750 μl，若混合液超过该体积请分多次进行上柱。 请弃废液后 将吸附柱放回收集管，继续转入剩余混合物到吸附柱 RA中离心。

4. 加入500 μl 漂洗液 RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000g 离心 30 sec，弃废液。

5. 重复步骤4 一次。

6. 将吸附柱 RA 放回空收集管中，12,000 g 离心 30 sec，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

7. 将吸附柱 RA 转移至新的 1.5 ml 离心管中，向吸附柱膜中央悬空滴加 40 - 60 μl 的 RNase-free ddH2O，静置 1 min，12,000 g 离心 1 min。。 ▲洗脱体积建议不少于 30 μl，体积过小会影响核酸回收效率。 ▲以下步骤都可以帮助提高 RNA 产物浓度： RNase-free ddH2O 于 90℃预热； 将第一次洗脱液重新加入吸附柱进行洗脱。

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